Hill : EC50 par ajustement logit

Agoniste inconnu. Relevez l’effet E pour plusieurs concentrations et obtenez EC50 par l’ajustement de logit(E/Emax) en fonction de log₁₀ C. Emax est connu.

Objectif

Déterminer EC50 d’après E = Emax C^{n_H} / (EC50^{n_H} + C^{n_H}). Le graphe du logit en fonction de log₁₀ C donne log₁₀ EC50 à partir de l’ordonnée à l’origine et de la pente.

Matériel

  • Agoniste inconnu
  • Emax connu
  • Série de concentrations
  • Dosage de l’effet

Expérience

Théorie

Pour E₀ = 0, logit(E/Emax) = ln(E/(Emax−E)) = n_H ln(10) (log₁₀ C − log₁₀ EC50). La pente vaut n_H ln 10, EC50 = 10^{−ordonnée à l’origine/pente}. Le banc cache EC50, n_H et E en direct. Emax est connu. C’est un TP dose–effet, pas Michaelis–Menten (cinétique enzymatique).

Mode opératoire

  1. Emax est fixe et connu (100). Ne faites varier que la concentration d’agoniste C. N’allez pas dans les queues où E ≈ 0 ou E ≈ Emax (le logit diverge).
  2. Notez. Le dosage inscrit E avec un léger bruit. Il n’y a pas de E, EC50 ni n_H en direct.
  3. Le tableau calcule log₁₀ C et le logit. Recommencez pour au moins 6 concentrations, environ de 0,3 à 30 autour du milieu inconnu.
  4. Ajustez le logit en fonction de log₁₀ C ; EC50 = 10^{−ordonnée à l’origine/pente}. Comparez à la valeur de référence et formulez la conclusion.

Conclusion

L’EC50 trouvée s’accorde avec l’agoniste caché. Sources d’erreur : bruit du dosage et travail hors des queues du logit. n_H n’est pas évalué.