P50 des Hämoglobins aus der Dissoziationskurve
Standardwerte für pH / T / pCO₂. Messen Sie die Sättigung S bei mehreren pO₂ und bestimmen Sie P50 aus der Hill-Linearisierung: ln(S/(1−S)) gegen ln pO₂.
Ziel des Versuchs
P50 aus S = pO₂ⁿ / (P50ⁿ + pO₂ⁿ) bestimmen. Der Graph ln(S/(1−S)) gegen ln pO₂ hat den Ordinatenabschnitt −n ln P50, also P50 = exp(−Ordinatenabschnitt / Steigung).
Geräte
- Begasungskammer für Blut
- Oxymeter
- pO₂-Regler
- Standard pH / T / pCO₂
Versuch
Theorie
Das Hill-Diagramm ist in den Logarithmen linear. Der Aufbau blendet das effektive P50, n und jede Kennzeichnung „Rechts-/Linksverschiebung“ aus. Die Bedingungen sind die Standardwerte (pH 7,40, 37 °C, pCO₂ 40 mmHg), daher ergibt sich das übliche P50 des Erwachsenen-Hämoglobins.
Durchführung
- pH, Temperatur und pCO₂ sind auf den Standardwerten festgehalten. P50 bleibt verborgen. Ändern Sie nur pO₂.
- Notieren Sie die Sättigung S (als Anteil). Es wird ein kleines Rauschen addiert. Es gibt keine laufende Anzeige von P50.
- Die Tabelle berechnet ln(S/(1−S)) und ln pO₂. Nehmen Sie Punkte mit S etwa zwischen 0,15 und 0,85.
- Wiederholen Sie das für mindestens 6 Sauerstoffpartialdrücke etwa von 12 bis 70 mmHg.
- Bestimmen Sie die lineare Ausgleichsgerade des Hill-Diagramms; P50 = exp(−Ordinatenabschnitt / Steigung). Vergleichen Sie mit dem Referenzwert.
Schlussfolgerung
Das bestimmte P50 stimmt mit dem verborgenen Standardwert des Erwachsenen-Hämoglobins überein. Wesentliche Unsicherheiten: Rauschen des Oxymeters und die Idealisierung der Hill-Gleichung.